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揭秘抗体亲和力成熟:原代细胞培养问题解答

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牛毛

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发表于 2023-10-10 23:35:33 | 显示全部楼层 |阅读模式
  原代细胞培养是建议细胞系的di一步,但是有很多小伙伴在原代细胞上就会有很多疑惑哦,主要有以下几大问题,小编都为大家整理好咯,搬上你的小板凳,一起来看看!
  一、原代细胞与细胞系有什么区别?
  答:根据传统定义,自组织di一次收获和接种的细胞被称为原代细胞,抗体亲和力成熟这类细胞直接从组织分离,生命周期有限,经数次传代后会逐渐停止生长。原代细胞在有限的生命周期内需掌握好细胞的大生长空间,以保持细胞群中基因型和表型的一致性。
  细胞系是不断生长、分化的细胞群,因其经过遗传改造,致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。
  但实际上,经过长时间、连续的传代培养后,细胞系随着代数的增加,细胞的基因型和表型都有可能发生改变。
  需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群,除非细胞经过了遗传改造。
  二、倍增和代数有什么区别?
  答:倍增是培养物中细胞总数的翻倍,通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出,传代培养过程的次数,传代培养的目的,是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。
  三、接收到的冻存细胞该如何处理?
  答:收到包装箱后,立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快,以避免升温。不要将细胞储存在-80℃,这样会对细胞造成不可挽回的伤害。
  四、冻存的细胞该如何开始培养?
  答:主要分为以下9点:
  1.将一管细胞从液氮罐中取出,注意保护手和眼睛。
  2.将冻存管快速的放入37℃水浴中,轻轻握住并旋转,直到管内物体*融化。
  3.将冻存管立即从水浴中拿出,擦干,转入无菌环境。
  4.用70%的酒精冲洗冻存管,然后擦去多余酒精。
  5.打开盖子,注意手指不要碰到里面的螺纹(注意,由于冻存管有负压,开盖时可能会有少量溢出,这是正常现象)。
  6.用多聚赖氨酸(或参照说明书)包被培养瓶。多数细胞推荐的接种密度为每平方厘米5000个细胞。
  7.盖好培养瓶的盖子,轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。
  8.将培养瓶放入培养箱中(37℃,5%CO2,95%空气)
  9.放入培养箱后第6-16小时更换一次培养基,以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞

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